抗菌制品測(cè)試方法及標(biāo)準(zhǔn)

 抗菌制品測(cè)試方法及標(biāo)準(zhǔn) 

 抗菌標(biāo)準(zhǔn)及測(cè)試方法的合理性及正確性對(duì)整個(gè)抗菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展起著重要的作用，包括測(cè)試方法設(shè)計(jì)的準(zhǔn)確性與科學(xué)性，操作誤差的合理控制，以及試驗(yàn)本身所帶來(lái)的誤差大小等。隨著國(guó)內(nèi)外抗菌產(chǎn)業(yè)的興起和科技的進(jìn)步,也促使抗菌標(biāo)準(zhǔn)與方法不斷完善。其中，國(guó)外抗菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展已經(jīng)有幾十年的歷史，所以較早就提出了具有代表性和穩(wěn)定性的抗菌測(cè)試方法，近年來(lái)又作了修改與完善。 近年來(lái)，國(guó)內(nèi)抗菌行業(yè)的專(zhuān)家與學(xué)者的也做了大量探索，促進(jìn)了國(guó)內(nèi)抗菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，并制定了相關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)。如FZ/T　01021－1992＜織物抗菌性能試驗(yàn)方法＞、GB15975－1995＜一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)＞及＜消毒技術(shù)規(guī)范＞等。目前，筆者和中國(guó)紡織標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)、等正在共同起草抗菌紡織品及其評(píng)價(jià)方法的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，該部抗菌紡織品標(biāo)準(zhǔn)及測(cè)試方法實(shí)施后將會(huì)對(duì)我國(guó)抗菌產(chǎn)業(yè)的發(fā)展起到重要的推動(dòng)作用。  檢測(cè)抗菌性能的抗菌制品一般分為三大類(lèi)型：第一種為抗菌紡織品，第二種為抗菌塑料，第三種為抗菌陶瓷。其中的檢測(cè)方法中包括對(duì)細(xì)菌的檢測(cè)和對(duì)霉菌的檢測(cè)。一般抗菌制品的測(cè)試方法分為定量試驗(yàn)方法和定性試驗(yàn)方法，也有的分為適于溶出型和非溶出型抗菌劑的檢測(cè)，還有的是按照菌液接種于織物上和織物置于一定濃度的菌液中兩條思路來(lái)分類(lèi)。  下面分別對(duì)抗菌紡織品及相關(guān)抗菌制品抗菌（細(xì)菌和霉菌）檢測(cè)方法進(jìn)行闡述。  一、抗菌紡織品測(cè)試方法  用于抗菌紡織品的測(cè)試方法如下：  1、奎因試驗(yàn)法（QUINN TEST）: 該方法是QUINN創(chuàng)立的織物抗菌性能測(cè)試方法，發(fā)表在<>{14(1),1-7,1966. 14(2),183-188,1966}。該方法的基本原理是將試驗(yàn)菌液接種于織物上，再覆蓋以半固體瓊脂培養(yǎng)基，在一定條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，觀察織物上的菌落數(shù)，計(jì)算出抑菌率。該方法也是世界上第一部測(cè)試織物抗菌能力的定量測(cè)試方法，簡(jiǎn)潔方便，應(yīng)用廣泛。  2、改良的奎因試驗(yàn)法：  著名的青島醫(yī)學(xué)院微生物學(xué)專(zhuān)家鄒承淑教授（筆者的重要合作伙伴）在八十年代初開(kāi)始改進(jìn)QUINN TEST，之后經(jīng)過(guò)國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)界共同努力完成了中國(guó)版的QUINN TEST--改良的奎因試驗(yàn)法。本方法是在奎因試驗(yàn)法的基礎(chǔ)上作了修改，原理也是將試驗(yàn)菌液接種于織物上，覆蓋以培養(yǎng)基，經(jīng)一定時(shí)間培養(yǎng)后，觀察計(jì)數(shù)抗菌和未抗菌織物上的菌落數(shù)，計(jì)算抗菌率的大小，定量測(cè)試抗菌織物的抗菌性能。本方法是一種簡(jiǎn)便、快速、重現(xiàn)性好的定量試驗(yàn)方法，對(duì)于原始的奎因試驗(yàn)法相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)：  ①一次能測(cè)試幾種不同織物對(duì)同一種細(xì)菌的抗菌性能，提高了測(cè)試效率，節(jié)省時(shí)間。  ②接種菌液濃度小（6000個(gè)/ml），營(yíng)養(yǎng)充足，菌落變大，易用肉眼來(lái)直接觀察菌落的生長(zhǎng)，避免用顯微鏡觀察造成污染。  ③稀釋菌液用生理鹽水代替肉湯，避免稀釋過(guò)程中細(xì)菌增長(zhǎng)，影響試驗(yàn)準(zhǔn)確性。 ④省略了織物加菌液后，在一定的相對(duì)濕度下干燥的過(guò)程，簡(jiǎn)化了實(shí)驗(yàn)步驟，也避免了干燥過(guò)程中因溫度掌握不準(zhǔn)而使細(xì)菌死亡的弊病。  但本方法中也存在一些不足之處：  ④本方法在覆蓋瓊脂培養(yǎng)基步驟中，為避免培養(yǎng)基溢出樣品外，將加菌液后的樣品平皿放入冰箱內(nèi)15min，其中沒(méi)有規(guī)定具體的溫度，不適合的溫度會(huì)造成細(xì)菌的死亡或增長(zhǎng)，一般在5-10℃能保證細(xì)菌不會(huì)死亡且不會(huì)增長(zhǎng)，但本方法中沒(méi)有規(guī)定，在樣品的挪動(dòng)過(guò)程中從而會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。  3、平行畫(huà)線法（條紋法）：  此種測(cè)試方法為簡(jiǎn)易、快速的定性試驗(yàn)方法，適用于耐水洗和耐干洗的抗菌整理織物的抗菌特性測(cè)試，其原理為：通過(guò)劃平行線的方法將菌液接種于瓊脂培養(yǎng)基上，將樣品貼于瓊脂表面上，在一定條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，檢查瓊脂表面沿劃線部位由于細(xì)菌繁殖中斷而出現(xiàn)的清潔區(qū)，為抗菌活性的大小劃分等級(jí)，評(píng)價(jià)織物抗菌能力的大小。  4、抑菌環(huán)試驗(yàn)法（暈圈法）：  將試驗(yàn)菌接種于瓊脂培養(yǎng)基平板表面，再貼放上試驗(yàn)樣品，由于抑菌劑不斷溶解以致在瓊脂中擴(kuò)散形成抑菌環(huán)，通過(guò)測(cè)量抑菌環(huán)的寬度來(lái)評(píng)價(jià)抗菌能力的大小。  5、AATCC　100試驗(yàn)法  此種測(cè)試方法為美國(guó)AATCC委員會(huì)提出的一種定量測(cè)試方法，用于檢測(cè)織物的殺菌能力和抑菌能力，是目前國(guó)外比較著名的抗菌性能測(cè)試方法，也是后來(lái)國(guó)內(nèi)外一些新方法的起源。此方法的原理為：織物對(duì)照樣與試樣經(jīng)細(xì)菌接種并在一定條件下培養(yǎng)后，加入中和液來(lái)洗脫細(xì)菌，且用稀釋平板法測(cè)定洗脫液中的菌液濃度，進(jìn)行活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)，得到抗菌織物的細(xì)菌減少百分率，評(píng)價(jià)該織物抗菌殺菌性能。  6、振蕩燒瓶法：  振蕩燒瓶法是模仿人體的穿著條件，使細(xì)菌在振蕩條件（300r/min）下與織物內(nèi)抗菌劑接觸，振蕩1-6h之后，經(jīng)細(xì)菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)，計(jì)算細(xì)菌減少百分率，從而確定抗菌性能大小。  應(yīng)用此測(cè)試方法時(shí)，被測(cè)試樣不受紡織品形狀的限制，本方法不僅適用于一般的紡織織物，而且還適用于凹凸不平的織物、有毛或羽的織物和粉末狀織物等，其使用范圍廣泛。而且還可適用于抗菌塑料、抗菌瓷磚等抗菌制品。塑料等拒水性材料應(yīng)先將其制成微粒再進(jìn)行試驗(yàn)。  7、FZ/T　01021－92試驗(yàn)方法  此方法是國(guó)內(nèi)根據(jù)美國(guó)的AATCC100－1981制定的紡織行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，是測(cè)試抗菌性能的一種定量測(cè)試方法。其基本原理為：將試驗(yàn)菌接種于織物（對(duì)照樣和試樣）上，經(jīng)“0”接觸時(shí)間培養(yǎng)和一定時(shí)間培養(yǎng)后，對(duì)樣品進(jìn)行洗脫，然后對(duì)其洗脫液進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，計(jì)算出試樣的細(xì)菌減少百分率。本方法對(duì)活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)中平皿菌落數(shù)的測(cè)定作了非常細(xì)致的規(guī)定，但是，本標(biāo)準(zhǔn)中一定時(shí)間培養(yǎng)后用100ml緩沖液洗脫，劇烈搖晃1min，此工藝還有待于探討，因?yàn)閯×覔u晃有可能會(huì)造成細(xì)菌的增長(zhǎng)或減少，就會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。  8、JIS　L　1902　1998試驗(yàn)方法  此方法為日本的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)定了定性試驗(yàn)方法（暈圈法）和定量試驗(yàn)方法（浸漬法）。其中定性試驗(yàn)方法只可測(cè)試出是否具有抗菌性能，而不能準(zhǔn)確測(cè)定出抗菌率。但此方法非常簡(jiǎn)便，易于操作。其原理為將試樣放于平板培養(yǎng)基中心，經(jīng)一段時(shí)間培養(yǎng)后，觀察樣品周?chē)�產(chǎn)生的抑菌環(huán)，計(jì)算抑菌環(huán)寬度，評(píng)價(jià)試樣是否具有抗菌能力。同時(shí)，其試驗(yàn)有效性的判定也非常簡(jiǎn)便，觀察未處理樣品經(jīng)培養(yǎng)后有沒(méi)有出現(xiàn)細(xì)菌增值即可。本方法中還對(duì)試樣的要求作了非常細(xì)致的規(guī)定，包括織物、紗線、軟填料和長(zhǎng)絨毛等。  定量試驗(yàn)方法（浸漬法）原理也是通過(guò)對(duì)試樣接種細(xì)菌與培養(yǎng)，對(duì)“0”時(shí)間接觸培養(yǎng)和一定時(shí)間培養(yǎng)后進(jìn)行活菌計(jì)數(shù)，計(jì)算出抑菌活性值和殺菌活性值。本方法特點(diǎn)為：  ①不同于其它方法中通過(guò)比濁管比濁來(lái)粗測(cè)菌液濃度的方法，而是用分光光度計(jì)測(cè)定其吸收率來(lái)確定菌液濃度，提高了試驗(yàn)的準(zhǔn)確度。  ②用冷凍的生理鹽水（0.85%）來(lái)洗脫培養(yǎng)后樣品，避免細(xì)菌在洗脫過(guò)程中增長(zhǎng)或減少，保證所需測(cè)定細(xì)菌數(shù)的準(zhǔn)確性，減少試驗(yàn)誤差。 ③在計(jì)算結(jié)果時(shí)，應(yīng)用抑菌活性值和殺菌活性值比較全面的來(lái)表現(xiàn)試樣的抑菌和殺菌能力，而且應(yīng)用對(duì)數(shù)值來(lái)體現(xiàn)試驗(yàn)結(jié)果。  9、JIS　L　1902　2002試驗(yàn)方法  本標(biāo)準(zhǔn)是在JIS　L　1902　1998試驗(yàn)方法的基礎(chǔ)上又進(jìn)一步修改而成的試驗(yàn)方法，本方法也是介紹了兩種試驗(yàn)方法，定性試驗(yàn)方法和定量試驗(yàn)方法，但是定量試驗(yàn)方法介紹了兩種，分別為菌液吸收法和細(xì)菌接種法，其定性方法（抑菌環(huán)法）和菌液吸收法同JIS　L　1902　1998標(biāo)準(zhǔn)中原理及方法基本相同，其細(xì)菌接種法原理是將細(xì)菌在加壓條件下接種至調(diào)濕過(guò)的試驗(yàn)片上，然后在一定濕度下培養(yǎng)一段時(shí)間，再對(duì)樣品進(jìn)行洗脫，活菌計(jì)數(shù)，得細(xì)菌減少值。  本方法對(duì)不同試驗(yàn)?zāi)康暮陀猛炯翱椢锊煌�處理�?yīng)用的試驗(yàn)細(xì)菌作了詳細(xì)的規(guī)定，并且介紹了菌液吸收法用于測(cè)定織物滅菌活性值，用細(xì)菌接種法，計(jì)算細(xì)菌減少值。  10、JIS　Z　2911抗霉菌試驗(yàn)法  本方法是針對(duì)于霉菌而制定的一種測(cè)試方法，其基本原理為：在樣品及培養(yǎng)基上均勻地噴灑一定量的混合孢子懸液，培養(yǎng)一定時(shí)間后，觀察試樣上的長(zhǎng)霉情況，對(duì)抗霉菌性能進(jìn)行分等級(jí)定性評(píng)價(jià)。 

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